במחקר שממצאיו פורסמו בכתב העת 'Chinese journal of cellular and molecular immunology', מטרת החוקרים הייתה לבדוק כיצד ויסות מטה (down-regulation) של ביטוי ה-high mobility group box 1י(HMGB1) ברקמת ריאה של עכברים עם מחלת ריאות חסימתית כרונית (COPD) משפיע על התגובה הדלקתית ועל ה-epithelial mesenchymal transitionי(EMT), וכן על המנגנון הקשור לכך.
עוד בעניין דומה
לצורך המחקר, מודל ה-COPD הושרה על ידי עישון סיגריות, וביטוי ה-HMGB1 ברקמת הריאה של העכברים ווסת מטה באמצעות RNA התערבותי קטן (siRNA). העכברים חולקו לקבוצת ביקורת שלילית (NC), קבוצת COPD, קבוצת COPD התערבותית si-NC, קבוצת COPD התערבותית si-HMGB1, וקבוצת COPD התערבותית עם טיוטרופיום ברומיד (קבוצת ביקורת חיובית).
לאחר 4 שבועות של עידוד לעישון סיגריות נבדק מצבם הכללי של העכברים. בנוסף לכך, מדי שבוע נרשמו שינויים במסת הגוף של כל קבוצה. החוקרים השתמשו בצביעת המטוקסילין-אאוזין (H&E stain) על מנת לבדוק את השינויים הפתולוגיים ברקמת הריאה של כל קבוצה, וב-PCR בזמן אמת ובתספיג חלבון (Western blot) על מנת לזהות את הביטוי של HMGB1 mRNA והחלבון ברקמת הריאה של העכברים. תספיג חלבון שימש גם לצורך זיהוי הביטוי של RAGE,יTLR4,יTGF-β1 והזרחון (פוספורילציה) של NF-κB p65. כמו כן, נאסף ה-BALF של העכברים מכל קבוצה, ונבדק באמצעות ELISA אחר רמות ה-IL-6,יTNF-α,יIL-1β ו-TGF-β1. צביעות אימונו-היסטו-כימיות שימשו לצורך הערכת הביטוי של E-cadherin ו-α-SMA ברקמות הריאה של העכברים.
לאחר שהחוקרים ביססו את מודל העכבר עם COPD שהושרתה באמצעות עישון סיגריות, נעשתה השוואה בין הקבוצות. לעומת קבוצת ה-COPD, ויסות-מטה של ביטוי ה-HMGB1 ברקמת הריאה שיפר באופן מובהק את הסימנים החיוניים הכלליים של העכברים, עודד את הגדלת מסת הגוף, ושיפר את הנזק הפתולוגי ברקמת הריאה של העכברים.
בהשוואה לקבוצת הביקורת, רמות ביטוי ה-HMGB1 mRNA והחלבון היו גבוהות יותר באופן מובהק בקבוצות ה-COPD,יCOPD בשילוב עם si-NC, ו-COPD בשילוב עם קבוצת הטיוטרופיום. עם זאת, לא נצפה ביטוי מובהק של HMGB1 בקבוצת ה-COPD בשילוב עם si-HMGB1. בנוסף לכך, בהשוואה עם קבוצת הביקורת נמצא כי רמות ה-IL-6, יNF-α, IL-1β,יTGF-β1 שהופרשו ב-BALF, רמות הביטוי של α-SMA,יRAGE,יTLR4,יTGF-β1 ורמות הזרחון של NF-κB p65 ברקמות הריאה היו מוגברות באופן מובהק בקבוצת מודל ה-COPD. עם זאת, רמות הביטוי של E-cadherin ירדו באופן מובהק.
בהשוואה לקבוצת ה-COPD או לקבוצת ה-COPD בשילוב עם קבוצת ה-si-NC, נמצא כי ברקמת הריאה של העכברים בקבוצת ה-COPD בשילוב עם si-HMGB1 ובקבוצת ה-COPD בשילוב עם טיוטרופיום השינויים של המדדים שהוזכרו לעיל ירדו באופן חד. לא נצפה הפרש מובהק בין שתי הקבוצות האחרונות.
החוקרים מסמכים כי ויסות-מטה של ביטוי ה-HMGB1 ברקמת ריאה של עכברים עשוי להפחית את התגובה הדלקתית הריאתית ואת ה- epithelial mesenchymal transition על ידי עיכוב של מסלול ה-NF-κB. ממצאים אלו עשויים לשפר את התקדמות החקר של מחלת ה-COPD הנגרמת כתוצאה מעישון סיגריות.
מקור:
הירשמו לקבלת עדכונים בנושאים שעלו בכתבה
